孔径太小□□□□,待测物不易流出□□□,分析时间长□,展宽严重 □□□□□。 孔径太大则很可能导致组分分不开 □□□□。 在做凝胶色谱时□□□□□□,需要先大致估计下待分析物的分子量□,然后选择 合适的柱子□□□□□□,如果不知道粒径□□□□,可先用大孔径的先试试□□□,接着再用 小粒径的以达到更高的精度□□。市售的柱子上都有该柱适用的分子量 范围□□□,一般选待测物分子量在色谱柱的最大分子量的20%-80%宜
填料的孔径太小□,待测物不易流出□□□,分析时间长□□□,展宽严重□;孔径太大则很可能导致组分分不开□□□。在做凝胶色谱时□□,需要先大致估计下待分析物的分子量□□□□,然后选择合适的柱子□,如果不知道粒径□,可先用大孔径的先试试□□□□,接着再用小粒径的以达到更高的精度□。市售的柱子上都有该柱适用的分子量范围□□□,一般选待测物分子量在色谱柱的最大分子量的20%-80%为宜□。
大多数用于HPLC分离的柱填料使用硅胶微粒(作担体)□□□。基于多孔聚会物担体或其它材料的色谱柱也已商品化□,这些非硅胶填料由于有其特殊的应用□□,以后再作讨论□□□。由于硅胶担体与键合的有机表层(如C18或C8)□□□□,应用范围广□□□,我们将作重点讨论□□□□。
图5-1所示为HPLC中常用的几种微粒类型□□。由于全多孔微球很好地兼顾了众多理想的性质□□□:效能□□□□□、样品荷载量□□□□、耐久性□□□、方便性以及有效利用率等□□□□,所以最为常用□□□□。这些微粒有不同的粒径□□□□、孔径和表面积供选择□□□,所以用这些物质能建立各类HPLC方法□□□□。
实心微球型微粒固定相有一实芯核□□□,起作用的是其表面很薄的外壳□。u乐国际,这些硅胶或聚会物基质的微粒□□□,通常为1□□□□.5~2□□.5μm□□,因为其快速传质的动力学过程□□□□□,对大分子有突出的福利效能□□□□。因为这些实心超小微粒的表面积较小□□,样品容量有限□□□□,所以仅适于分析型HPLC□□□□□。这种超小微粒的色谱柱出峰极为尖锐(小体积)□,因此要求所用HPLC仪器的柱外峰展宽因素极小□□□□□,以避免峰展宽□□□。
灌注色谱填料包含孔径达4000~8000A0(艾)的贯穿孔□□,而且在这些贯穿孔网络中还有较小的内联孔(如300~1000A0(艾))□。在高流速时□□,溶质可通过对流和扩散的共同作用□,进入(并离开)该孔结构□□□□。其效果减少了峰展宽□□□,所以大的多孔微粒在柱效方面与小微粒相当□□□□□□,但压力降却小得多□。目前这种类型填料的使用还较少□□□,因此□□□□,其实用性还有待于进一步探讨□□□。不过□□□□,这种填料似乎非常适于大分子如蛋白质的制备分离□□□,用于小分子的日常分析分离则较少□□□□。
颗粒大小(粒度)在HPLC中极为重要□□□□。约5μm的微粒直径很好地兼顾了分析柱的柱效□□□□□、反压和寿命□□。更小的多孔微粒(如3μm)对快速分离很有用□□。小至1□□.5μm的薄壳微粒对极快速地分离蛋白质等大分子较有用□□。较窄的粒度分布(±50%均值)能保证填充床的稳定□、高效和压力降最小□□□□。总的说来□,3或5μm全多孔微球填充HPLC色谱柱□□□□□□,能满足大多数分离的需要□□□,我们推荐大多数的方法建立用这些粒度的色谱柱□□□□□。
表5-1总结了HPLC分离用微粒的理想的物理特性□□□□□,以及它们的重要性□□□。一般使用7~12nm(70~120 A0(艾))孔径的全多孔微粒□□□□□。表面积150~400m2/g的全多孔微粒分离小分子较有利□□□□。表5-2列出一些窄孔径C18商品柱的典型物理性质□□□□□□。对于分子量大于10000Da分子的分离□,需用孔径大于15nm的微粒□□□□□□,使这些溶质容易进入到微孔结构内部的活性表面□。各种情况下□,都应保证溶质在微孔里能迅速扩散与柱效良好□□□。孔径至少是溶质流体动力学直径的4倍□□,才能确保溶质的有限扩散不至于使柱效下降□□□□□。大孔微粒的比表面积有10~150m2/g不等□□□□□□,取决于微孔直径的大小□□□□□;孔径越大表面积越小□□□□□。
孔径□,指的是硅胶表面上的小孔的直径□,是一个平均值□□□□。常规的液相色谱柱都是在硅胶表面健合特定的官能团□□□□□□,孔径的大小影响官能团健合的密度□□□□。同等粒径的硅胶□□□□□,孔径越大□□□□,硅胶的比表面积越小□,硅胶表面健合的官能团密度越低□□□□□,也就是C%越低□□□□□;反之□□,孔径越小□□,比表面积越大□□□,官能团健合的密度越高□□。另外□□□□□□,如果用来分离生物大分子□□□□□,就要选择孔径较大的(例如300A)的填料□,这样才会得到充分的保留□□□□。
两种型号的陶瓷拉西环□,50*50*4□□□□□□.5mm□□□□□□,25*25*2□□.5mm□...
查看详情1□□□.本站不保证该用户上传的文档完整性□□,不预览□、不比对内容而直...
查看详情填料厂家黄页是百纳信息网为您专业提供的填料生产厂家与填料企业黄页和填料...
查看详情塔内放置着填料(packings)。填料种类很多。用于制造填料的材料有碳钢、不锈...
查看详情邯郸乳化沥青冷再生拌合站 价格更低成桩要控制稳定土搅拌设备的提升速度和...
查看详情中国中铁航空港建设集团有限公司乐清湾港区铁路支线人 经理部下设工程管理...
查看详情中铁十一局集团哈佳铁路 HJZQ-4 标项目部 级配碎石拌和站施工方案 目 录 1 编制...
查看详情孔径太小□□□□,待测物不易流出□□□,分析时间长□,展宽严重 □□□...
查看详情萍乡市恒昌化工新材料有限公司位于江南重要化工工业城市之一的萍乡市,紧靠...
查看详情工业领域需求各不相同。其中电子厂适用聚脲地面、自流平环氧地面、丙烯酸酯...
查看详情